第291章 《哀丽秘榭的白默》（重制） (第2/2页)

·聚酰胺柱：适合黄酮（氢键吸附），用30%-95%乙醇梯度洗脱（如先水洗去糖，再用50%乙醇洗黄酮）。
　　
　　·硅胶柱：对黄酮苷元效果好，洗脱剂用氯仿-甲醇梯度（如10:1→5:1）。
　　
　　·大孔树脂（如AB-8、D101）：先水洗去糖，再用30-70%乙醇洗脱黄酮。
　　
　　·操作要点：
　　
　　·上样量不超过柱体积的1/10，流速1-2BV/h。
　　
　　·分段收集，通过TLC（硅胶G板，展开剂：乙酸乙酯-甲酸-水=8:1:1）或HPLC监测目标成分。
　　
　　重结晶
　　
　　·对纯度较高的部分，可用甲醇-水或乙醇-乙酸乙酯混合溶剂重结晶。
　　
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　　4.鉴定与验证
　　
　　·显色反应：
　　
　　·盐酸-镁粉反应（橙红色）、AlCl3反应（黄色荧光）初步确认黄酮。
　　
　　·HPLC/MS：
　　
　　·对照品比对（如芦丁、槲皮素等），或通过质谱分析分子量及结构。
　　
　　·UV光谱：黄酮类在250-280nm（BandII）、330-380nm（BandI）有特征吸收。
　　
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　　注意事项
　　
　　1.避免氧化：提取过程避光、氮气保护，尤其对含酚羟基的黄酮。
　　
　　2.梯度优化：柱层析时需预试验确定最佳洗脱比例。
　　
　　3.得率与纯度平衡：高纯度可能损失得率，需根据需求调整（如药用需≥95%）。
　　
　　4.中试放大：若工业化生产，需优化溶剂回收、树脂再生等成本问题。
　　
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　　示例流程（简化版）
　　
　　黄精粉→70%乙醇回流→浓缩→AB-8树脂（水洗→50%乙醇洗）→浓缩洗脱液→聚酰胺柱（水→30%乙醇）→冷冻干燥→黄酮组分（纯度可达80%以上）。
　　
　　通过上述方法可高效分离黄精黄酮，后续可结合制备型HPLC或结晶进一步提高纯度。